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Jul 01, 2023

Implementando uma nova sonda de captura e ligação

Malaria Journal volume 22, número do artigo: 21 (2023) Citar este artigo 1337 Acessos 2 Altmetric Metrics detalha o rastreio e tratamento em massa (MSAT) para a eliminação da malária carece de um diagnóstico ideal

Malaria Journal volume 22, Artigo número: 21 (2023) Citar este artigo

1337 Acessos

2 Altmétrico

Detalhes das métricas

O rastreio e tratamento em massa (MSAT) para a eliminação da malária carece de uma ferramenta de diagnóstico ideal que permita testes sensíveis e acessíveis da população-alvo no terreno. Este estudo avaliou se a Sonda de Captura e Ligação-PCR (CLIP-PCR) poderia ser usada em um MSAT de campo na cidade de Laiza, Mianmar.

No dia 0, duas gotas de sangue seco foram coletadas de cada participante. No dia 1, todas as amostras foram triadas para Plasmodium em um laboratório de 20 m2 com bancada, armário de biossegurança, geladeira, incubadora de bancada e máquina qPCR, por quatro técnicos utilizando CLIP-PCR com pooling de amostras, em um posto de saúde de a cidade fronteiriça chinesa de Nabang. No dia 2, todos os positivos foram acompanhados e tratados.

Das 15.038 pessoas (65% da população total) examinadas, 204 (1,36%) foram CLIP-PCR positivos. Entre eles, 188, 14 e 2 estavam infectados por Plasmodium vivax, Plasmodium falciparum e P. vivax/P. mistura falciparum, respectivamente. A capacidade de testagem foi de 538 pessoas/dia, com um custo de US$ 0,92/pessoa. A proporção de infecção submicroscópica foi de 64,7%. Todos os indivíduos positivos receberam tratamento dentro de 72 horas após a coleta de sangue.

A utilização do CLIP-PCR no MSAT em locais de baixa transmissão pode apoiar os esforços de eliminação da malária na região fronteiriça entre a China e Mianmar.

O rastreio e tratamento em massa (MSAT) da malária é definido como o teste de uma população inteira numa vasta área geográfica, seguido do tratamento apenas de indivíduos positivos, independentemente de apresentarem sintomas de malária. Esta abordagem fornece informações importantes sobre a epidemiologia da malária, que podem ser úteis para futuros esforços de contenção da doença [1], e é mais provável que seja aceite pela população-alvo do que a administração em massa de medicamentos [2]. Além disso, o tratamento profilático em massa com primaquina para controlar surtos de Plasmodium vivax pode ser perigoso devido a uma elevada taxa de deficiência de glicose-6-fosfato desidrogenase (até 14,8%) na população do distrito alvo [3]. Embora recentemente a estratégia MSAT tenha recebido atenção renovada no contexto da eliminação da malária, a Organização Mundial da Saúde (OMS) não recomendou o MSAT como estratégia de intervenção para interromper a transmissão da malária, pois falta uma ferramenta de diagnóstico altamente sensível e de alto rendimento. que é ao mesmo tempo econômico e fácil de operar em campo [2, 4].

Para superar esse desafio, foi desenvolvido um ensaio molecular de alto rendimento em uma plataforma de placas de 96 poços chamado Capture and ligation probe-PCR (CLIP-PCR) [5], permitindo a detecção direta de RNA da malária sem purificação de ácido nucleico e transcrição reversa. com um limite de detecção de 0,01 parasita da malária/µL de sangue ou cerca de 0,33 parasita/µL se usar gota de sangue seco (DBS) de 3 mm [5, 8]. Isto cumpre o limite de detecção recomendado pela OMS (2 parasitas/µL ou menos) para o rastreio da malária baseado em PCR em locais de baixa transmissão [6], ao mesmo tempo que torna o rastreio da malária mais fácil e menos dispendioso do que a microscopia e o nested PCR padrão [7, 8]. Neste método, os alvos de 18 S rRNA em amostras de sangue são liberados através de lise celular e capturados por uma série de sondas específicas com cauda nos poços de uma placa de captura de 96 poços através de hibridização em sanduíche. Após a remoção de sondas extras e impurezas, as sondas com cauda ligada são ligadas para formar modelos de fita simples para subsequente amplificação e detecção de qPCR [5]. Recentemente, uma versão melhorada do CLIP-PCR, o CLIP-PCR multi-seção (mCLIP-PCR), foi desenvolvida, permitindo a identificação de gêneros e espécies de Plasmodium com um tempo de ensaio muito mais curto [9].

A Região Especial II de Kachin (KSR2), uma área montanhosa pobre localizada no norte de Mianmar, compartilha uma fronteira terrestre de 214,6 km com o condado de Yingjiang, na província de Yunnan, na China. Desde o conflito regional em KSR2 em 2012, um grande número de pessoas deslocadas internamente imigraram e foram reinstaladas ao longo da fronteira China-Mianmar, representando um risco para os resultados das atividades conjuntas transfronteiriças de prevenção e controlo da malária entre a China (província de Yunnan) e Mianmar [10,11,12,13,14]. No KSR2 de Myanmar, a incidência da malária aumentou de 2,1% em 2012 para 5,1% em 2016 [15]. Além disso, um surto de P. vivax foi observado na cidade de Laiza e arredores em 2016 [16], onde o número de casos de malária aumentou acentuadamente em 2,3 vezes, de 940 em 2015 para 2.080 em 2016 [16]. O número de casos de malária importados de Mianmar para o condado de Yingjiang aumentou rapidamente de 35 em 2012 [17] para 185 em 2016 [16], comprometendo a meta de eliminação da malária no condado de Yingjiang até 2020 [18,19,20].